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课题1 微生物的实验室培养 教学设计
一、教材分析
课题背景通过生产中的实例，首先引导学生认识在微生物的培养过程中，保持培养物纯净的重要性。教师不必拘泥于教材中列举的实例，可以充分发挥学生的主动性，让学生搜集列举更多的生产生活中的实例，从中体会培养物纯净对于微生物培养的重要性。在此基础上，教材让学生进一步明确培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。
二、教学目标
1．知识与技能
a、了解培养基的用途、种类及一般成分，b、掌握培养基制作的一般的步骤，c、掌握微生物分离中的划线法和涂布法。2．过程与方法
学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。3．情感、态度与价值观
体验微生物与现代生物技术之间的密切的关系。
三、教学重点：
培养基的制备、微生物的培养的操作。
四、教学难点：
培养基的制备和微生物的分离。
五、教学过程
（一）导入新课：在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）正课：
一、微生物基础知识
（一）微生物概念：微生物一般是指一切肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。
（二）微生物类群：
（三）细菌 1.细菌的结构
一般结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核
特殊结构：鞭毛、荚膜、芽孢（细胞内椭圆形的一种休眠体，帮助细菌渡过不良环境）2.细菌的繁殖：分裂生殖（二分裂）3.菌落：
（1）单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群体。（2）特征：大小、形状、光泽度、硬度、透明度等。如肺炎双球菌的R菌菌落表面粗糙，S菌菌落表面光滑。
（3）功能：是鉴定菌种的重要依据，（四）、微生物需要的营养及功能： 1．细胞的化学元素组成：C、H、O、N、P 2.营养要素物质：C源、N源、生长因子、水、无机盐
（三）课题1 微生物的实验室培养
一、基础知识：
（一）培养基：培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.培养基的类型和用途：
（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。
（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 ：(1)消毒：使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）
（2）杀菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。3.常用的消毒和灭菌的方法：（1）消毒方法：
a、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min b、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min c、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 d、紫外线消毒 ……
（2）灭菌方法： a、灼烧灭菌
b、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。
c、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min.4.微生物实验室基本操作程序： a.器具的灭菌 b.培养基的配制 c.培养基的灭菌 d.倒平板 e.微生物接种 f.恒温箱中培养 g.菌种的保存
二、实验操作
（一）.制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.培养基制备方法
2、教师演示制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤是：
a．计算：根据培养基配方比例，计算配制100ml的培养基，各种成分用量。b．称量：准确称取各种成分。
c．溶化：将称好的牛肉膏加少量水溶化后，加入称量好的蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶解，并补加蒸馏水定容至100ml。
d．灭菌：将配置好培养基转移到锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。
e．倒平板：待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。
教师讲解到平板的才操作方法，以及解决讨论题。
（二）纯化大肠杆菌
微生物接种方法常有平板划线法和稀释涂布平板法
1、教师讲解平板划线法。课本18页，并解决问题讨论。
2、教师讲解系列稀释方法以及涂布平板操作。课本19页，并解决讨论题
（三）微生物的恒温培养
（四）菌种的保存
三、结果分析与评价
㈠.培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
㈡.接种操作是否符合无菌要求
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。㈢.是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。
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