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二苯胺鉴定dna
实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的，二苯胺鉴定dna。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
DNA分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解，产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊酸，后者与二苯胺试剂反应产生蓝色化合物，其反应如下图。蓝色化合物在595nm处有最大吸收，且DNA在40µg ~400µg范围内时，吸光度与DNA浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。
甲基绿能把DNA染成绿色，为什么在DNA粗提取与鉴定试验中则用二苯胺鉴定?带着这个问题我上网查资料，经过我反复的思考，哈哈.....终于想明白了。我们在观察DNA、RNA的分布实验中用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂染色，由于甲基绿和吡罗红与DNA、RNA的亲和力不一样，呈绿色的是DNA，呈红色的是RNA，我们很容易用显微镜观察到DNA、RNA主要分布在那里?里面强调的是用甲基绿和吡罗红混合染色剂，所以隐含的意思是不能单独使用一种染色剂，要是单独用甲基绿染色就会把RNA染成绿色，鉴定材料《二苯胺鉴定dna》。DNA粗提取与鉴定这个实验，DNA鉴定则换成用二苯胺，在这个DNA粗提取过程中，用改变氯化钠浓度办法将蛋白质与DNA分开，用冷酒精处理进一步将DNA与RNA、蛋白质分开。一系列的操作就是要获得纯度较高的DNA，最后获得的纯度较高的DNA不能排除有RNA，所以此时用甲基绿鉴定DNA、RNA都被染成绿色，所以不能说绿色一定是DNA拍卖公司而改用二苯胺就不一样了，DNA和二苯胺反应的产物成蓝色，RNA则没有这种颜色反应。所以用二苯胺鉴定呈蓝色的一定是DNA，并且蓝色深浅与DNA含量高低有关。
1、二苯胺与甲基绿能否混用
这是用于鉴定DNA的存在的两种试剂，二苯胺加热法中，呈现蓝色反应。用甲基绿溶液直接滴在有DNA丝状物的载玻片或玻棒上，呈蓝绿色反应。只用一种即可，不混合用。前者要加热，后者不加热。
2、两者都可以和DNA反应，应该怎样区分它们呢
甲基绿甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色
3、DNA的鉴定→DNA的鉴定可用二苯胺法，DNA遇到二苯胺变为蓝色;还可以用“甲基绿”法，“甲基绿”使DNA变为蓝绿色。
用“甲基绿”法鉴别DNA时，可将“甲基绿”直接滴到玻璃棒的丝状物上后，要用水充分冲洗掉浮色后再观察。
配制二苯胺试剂→取0.1毫升B液，滴入到10毫升A液中，混匀。⑦鉴定→取4毫升DNA提取液放入试管中，加入4毫升二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
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