PCR检验实验室检查要点指南由刀豆文库小编整理，希望给你工作、学习、生活带来方便，猜你可能喜欢“实验室过程检验规程”。
《PCR检验实验室检查要点指南》概述
北京市医疗器械技术审评中心（100061）郑婕 冯路 赵阳 王辉
摘要：目的目的 明确体外诊断试剂生产企业PCR检验实验室设置和管理相关要求，指导并规范监督管理部门开展现场检查工作。方法方法 采用收集相关文献资料、结合北京市生产企业现状、组织企业验证、经过相关专家讨论、公开征求意见后最终确定主要检查要求。结果与结论结果与结论 要点指南从实验室布局、仪器设施配置、现场及文件检查工作流程及注意事项、人员培训情况四个方面描述了现场检查重点关注的内容。关键词：PCR检验实验室；检查要点指南；工作流程；注意事项
中图分类号：R955 文献标识码：A文章编号：1005-8257（2015）11-0004-02 PCR检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或RNA的检验实验室。聚合酶链反应（PCR）是一种在体外特异性扩增靶DNA序列的技术，其基本过程为模板双链DNA的变性、引物与模板DNA的退火和在DNA 聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板，理论上，扩增产物量呈指数形式上升，即经过n个循环后，产物量增加到2n倍，在短时间内可在体外可获得数百万个特异靶DNA序列的拷贝。PCR检测试剂越来越成为临床疾病的诊断治疗监测、预后评估的重要手段。PCR检测试剂生产企业也越来越多。但在实际检查中，笔者发现，各个企业PCR检测实验室设置各不相同，管理方式千差万别。
PCR检验实验室是PCR试剂的生产企业在产品检验过程中不可缺少的工作环境，其环境控制水平和质量管理水平直接影响着最终产品的质量。由于该产品本身的特殊性，《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》中，明确对PCR试剂的生产和检验环境做出了规定。《PCR检验实验室检查要点指南》旨在指导北京市医疗器械现场检查人员对PCR检验实验室的现场检查工作。同时，为PCR类体外诊断试剂生产企业在PCR检验实验室的设计和管理要求方面提供参考，将于年内正式发布。1 适用范围
本《指南》可作为北京市食品药品监督管理局组织、实施的《医疗器械生产许可证》核发、变更、换证等现场检查，体外诊断试剂生产实施细则检查，医疗器械生产监督检查等各项涉及PCR检验实验室检查的参考资料。基因测序检验实验室等涉及PCR实验的相关部分应参照本《指南》执行。2 检查要点及流程
2.1 现场观察企业PCR检验实验室布局 PCR检验实验室的设计决定了检验环境的优劣，企业应提供PCR实验室设计方案和/或平面设计图（应标明风向或压差梯度）。①为防止在检验过程中产生的气溶胶对生产过程的不利影响，按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求，PCR检验实验室与PCR产品生产区域应在各自独立的建筑物中。②原则上PCR检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。根据使用仪器的功能。区域可适当合并。若使用实时荧光定量PCR仪且不需要进行后续产物分析工作，扩增区、扩增产物分析区可合并[1]。若使用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分 析区可合并。
③各区域在物理空间上应完全相互独立，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态。不应只是形式上的分区，不应一个区域嵌套一个区域。④各区域不应有空气的直接相通。扩增区与扩增产物分析区各区域宜采用独立直排方式出风。采用空调机组方式的，PCR实验室应具备独立空调机组；同时应考虑停机后各房间空气连通的可能性，采取必要的控制措施。
⑤按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力应以递减的方式进行，使得PCR检验实验室的空气流向应按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。空气流向应为单向，禁止下游污染上游。应设置合理的压差梯度，并安装压差监测装置，以有效证明空气流向，考虑到北京常年平均风力的情况，结 附图1 缓冲间为负压的理想PCR实验室设置模式 附图2 缓冲间为正压的理想PCR实验室设置模式
PCR检验实验室检查要点指南2016年8月31日，北京市食品药品监督管理局发布了《PCR检验实验室检查要点指南（2016版）》，具体内容如下：聚合酶链反应（PCR）检验实验室检查要点指南（2016版）聚......
PCR检验实验室检查要点指南（征求意见稿）PCR检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或RNA的检验实验室。聚合酶链反应（PCR）是一种在体外特异性扩增靶DNA序列的技术，其基本......
聚合酶链反应（PCR）检验实验室检查要点指南（2016版）聚合酶链反应检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或RNA的检验实验室。聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction ，PCR......
企业PCR检验实验室布验收注意事项企业应当提供PCR实验室设计方案和/或平面设计图（应当标明风向或压差梯度）。 1.PCR检验实验室与PCR产品生产区域应当在各自独立的建筑物或空间......
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史......
