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篇1：细菌3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的纯化及性质研究
细菌3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的纯化及性质研究
细菌Bacillus sp.2粗酶液通过(NH4)2SO4分级分离、Q Sepharose FF、Sephadex G-100(Ⅰ)、Hydroxyapatite和Sephadex G-100(Ⅱ)柱层析分离,纯化了一种以NADPH为辅酶的3-脱氧葡糖醛酮(3-DG)代谢酶,定性为2-羰基醛还原酶.纯化酶的比活力为63.75 U/mg,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶上显示一条蛋白质带.该酶分子质量约为32 ku,酶反应最适pH约为6.2, 在pH 5～8, 温度25～30℃之间酶保持稳定;该酶对3-DG的`Km为2.3 mmol/L.添加适量的EDTA、巯基乙醇或二硫苏糖醇能明显提高酶的活性;而碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺抑制酶的活性.
作 者：梁智群 粟桂娇 李湘萍 莫柏立 梁静娟 LIANG Zhi-Qun SU Gui-Jiao LI Xiang-Ping MO Bo-Li LIANG Jing-Juan 作者单位：广西大学工业测试实验中心,南宁,530004 刊 名：生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU英文刊名：PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 27(2) 分类号：Q554.2 关键词：美拉德反应 3-脱氧葡糖醛酮 细菌 还原酶 纯化 性质篇2：壳聚糖酶的分离纯化及性质研究
壳聚糖酶的分离纯化及性质研究
以本实验室分离的'产壳聚糖酶YJ02菌株出发,制备壳聚糖酶发酵液,经离心、(NH4)2SO4分级盐析、Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换、Sephacry S-100 凝胶过滤分离纯化步骤,SDS-PAGE显示为一条带,壳聚糖酶纯化了28.9倍,收率为47.6%.该酶的性质研究表明,该酶的分子量为66.2KD,最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0;Mn2+对酶活力有明显的促进作用,Cu2+,Fe3+,Hg2+对酶活力有抑制作用;小分子有机物EDTA和SDS对酶活力有抑制作用,而IAA和β-巯基乙醇对酶活力稍有促进作用.该壳聚糖酶对高脱乙酰度壳聚糖底物水解作用强,酶解位点可能为NGlc-NGlc,酶最大反应速度Vmax=4.1μmol/min,常数Km为64mmol/L.此壳聚糖酶水解壳聚糖制备的壳寡糖数均分子量为2 400Da.
作 者：韩宝芹 菊林 刘万顺 郝日光 HAN Bao-Qin YANG Ju-Lin LIU Wan-Shun HAO Ri-Guang 作者单位：中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003 刊 名：中国海洋大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA 年，卷(期)： 36(2) 分类号：Q503 关键词：壳聚糖酶 分离纯化 酶学性质 壳寡糖篇3：内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质
内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质
利用AKTA UPC-900快速蛋白液相色谱系统(FPLC)从黑曲霉发酵粉中分离纯化出内切β-葡聚糖苷酶.分离纯化后的酶比活力提高了8.1倍,回收率为7.5%.经SDS-PAGE电泳分析该内切酶的相对分子质量为26 400.酶学试验研究表明:该酶的最适反应温度为55℃,最适pH为4.8,Lineweaver-Burk法求得动力学参数,Km和Vmax分别为6.838×10-3mg/mL、2.906×10-2(mL・min)/mg.并确定了FPLC层析缓冲液的`离子强度为4.8 mmol/L时分离效果达到最佳.
作 者：孟广荣 杨树林 曾亮亮 李新柱 蔡凤 MENG Guang-rong YANG Shu-lin ZENG Liang-liang LI Xin-zhu CAI Feng 作者单位：南京理工大学,生物工程研究所,江苏,南京,210094 刊 名：食品与生物技术学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 25(2) 分类号：Q814.1 关键词：黑曲霉 纤维素酶 内切β-葡聚糖苷酶 分离纯化 酶学性质 动力学篇4：瓜蒌纤溶酶的分离纯化及性质研究
瓜蒌纤溶酶的分离纯化及性质研究
利用亲和层析从瓜萎蛋白粗提液中分离纯化得到一纤溶酶,并对其部分酶学性质进行研究.结果表明,该酶表观分子量为66.0 kD;最适pH值为9.0;在4～40℃活性无明显变化,78℃以上完全失活;在以酪蛋白为底物的'水解反应中,温度、酶底物比、pH值、反应时间4种因素对水解反应的影响力大小为:温度>酶底物比>反应时间>pH;Km值为1.89mg/mL,Vmax=555.56μmol/(L・min).
作 者：李尧 周艳芬 郭晓军 胖铁良 朱宝成 LI Yao ZHOU Yan-fen GUO Xiao-jun PANG Tie-liang ZHU Bao-cheng 作者单位：李尧,LI Yao(河北大学生命科学学院,河北,保定,071002)周艳芬,ZHOU Yan-fen(河北大学生命科学学院,河北,保定,071002;河北省生物工程研究中心,河北,保定,071002)
郭晓军,胖铁良,GUO Xiao-jun,PANG Tie-liang(河北农业大学生命科学学院,河北,保定,071001)
朱宝成,ZHU Bao-cheng(河北大学生命科学学院,河北,保定,071002;河北农业大学生命科学学院,河北,保定,071001)
刊 名：畜牧与饲料科学 英文刊名：ANIMAL HUSBANDRY AND FEED SCIENCE 年，卷(期)： 30(4) 分类号：Q556 关键词：瓜蒌 纤溶酶 亲和层析 Km值篇5：酸性α-淀粉酶的分离纯化与酶学性质研究
酸性α-淀粉酶的分离纯化与酶学性质研究
纯化了枯草芽胞杆菌xm-1菌株酸性α-淀粉酶,并对其酶学性质进行了研究.通过硫酸铵沉淀和Sephadex G-75凝胶层析将酸性α-淀粉酶粗酶液纯化了32.5倍,活力回收率为10.0%.酶性质测定结果表明,该酸性α-淀粉酶分子量约为60 kD,最适反应温度为45℃、最适作用pH5 0,该酶在pH3 4-6 0下稳定,高温耐受性差.Cu~(2+)、Zn~(2+)、EDTA对酶有不同程度的抑制作用,Ca~(2+)和Mn~(2+)对酶具有较强的激活作用.
作 者：胡元森 潘涛 李翠香 Hu Yuansen Pan Tao Li Cuixiang 作者单位：河南工业大学生物工程学院,河南工业大学粮油重点实验室与工程中心,郑州,450052 刊 名：生物技术通报 PKU英文刊名：BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： “”(3) 分类号：Q5 关键词：酸性α-淀粉酶 蛋白纯化 酶学性质 Acid-stable α-amylase Protein purification Enzymatic properties篇6：高产耐热3-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究
高产耐热3-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究
以粘红酵母(Rhodotorula glutinis)Q0402为出发菌株,经紫外谤变,得到一株粘红酵母QX0402.5 L发酵罐的发酵液中3'-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的`最高酶活力的2.5倍.所产生的3'-磷酸二酯酶在70℃下保温1 h,酶活力仍有50%以上.该酶最适反应pH为5.4,最适反应温度为60℃,反应3 h的反应转化率为56.37%,底物浓度可以提高到3%,生产效率为文献报道的3倍.
作 者：修俊鹏 丁庆豹 欧伶 邱蔚然 XIU Jun-peng DING Qing-bao OU Ling QIU Wei-ran 作者单位：修俊鹏,丁庆豹,欧伶,XIU Jun-peng,DING Qing-bao,OU Ling(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237)邱蔚然,QIU Wei-ran(上海秋之友生物科技有限公司,上海,201612)
刊 名：华东理工大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2006 32(3) 分类号：Q55 关键词：3'-磷酸二酯酶 3'-核苷酸 粘红酵母 诱变育种土壤中细菌、放线菌、酵母菌及霉菌的分离与纯化一、实验目的1.学习、掌握从土壤稀释分离、划线分离各类微生物的技术。2.学习从样品中分离、纯化出所需菌株。3.学习并掌握平......
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