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梅县区慢性病防治院作业指导书
文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程
版号：第 1 版
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HIV抗体初筛检测程序
1.实验准备：试验开始前将试剂和样品放置在室温，按实验室SOP或者试剂说明书做好试剂准备。
2.实验操作（以华大吉比爱生物技术公司的Anti-HIV 1+2 Antibody ELISA Kit 为例）：
a 取出HIV抗原包被板。每次试验设空白对照1孔，阴、阳性对照2孔。除空白对照外，分别加入HIV阴、阳性对照各50微升，其余孔加入待检血清各50微升。贴上封口胶，置37℃温育30分钟
b 将50倍浓缩液用纯化水50倍稀释后备用
c 弃去各孔中样品、拍干。每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。
D 除空白孔外，每孔加入酶标抗原工作液50微升，贴上封口胶。37℃温育20分钟。
e 弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）f 每孔加入底物液A 50微升，再加入底物液B 50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色10分钟
g 显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即以空白孔调零，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）3.结果报告：对呈阴性反应的样品，可由初筛实验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复查，不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。梅县区慢性病防治院作业指导书
文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程
版号：第 1 版
1/2 4.复检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。
5.复检报告：两种试剂复测均呈阴性反应的，则出具HIV抗体阴性；均呈阳性反应或者一阴一阳的，需送艾滋病确认实验室进行确认。
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