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《拐枣中生物活性物质抗氧化研究》
项目建议书
一、概述 1.项目提出背景
拐枣，又名鸡爪连、金钩梨、拐枣儿、臭杞子、鸡爪子、龙爪等，鼠李科、枳椇属落叶乔木，高达10米多；嫩枝、幼叶背面、叶柄和花序轴初有短柔毛，后脱落。叶片椭圆状卵形、宽卵形或心状卵形。果柄含多量葡萄糖和苹果酸钾，经霜后甜，可生食或酿酒，俗称“拐角”；木材硬度适中，纹理美，供建筑及制家具和美术工艺品等的用材。分布陕西、江西、安徽、浙江、广东、福建、湖北、湖南、广西、四川、贵州、云南等省。果实形态似万字符“卍”，故称其树为万寿果树。果实熟透可生吃，果肉多浆，无果核，种子裸露在果肉之外，味浆甜略有甘涩，亦可做汤，汤味独特醇香。
枳椇子具有一系列医用价值：第一，它含有大量的葡萄糖、有机酸，既能扩充人体的血容量，又能解酒毒，故有醒酒安神的作用。第二，枳椇子含有大量水分、葡萄糖、有机盐、脂类物质，具有促进尿液排泄，加速肠道蠕动等作用，故能通利二便。第三，枳椇子中含有大量的钙和枳椇子皂甙，具有中枢抑制作用，能够抗惊厥，防止手足抽搐痉挛，可用来治疗风湿痹痛麻木之症。第四，枳椇子中含有大量的葡萄糖、蔗糖、果糖、有机酸、无机盐、维生素等，能生津止渴，清热除烦，并能给人体补充养分，增强机体的抗病能力。第五，近年来研究发现，枳椇子中含有麦草碱、B-咔啉、枳椇甙C、D、G、H、鼠李碱等，具有抗脂质过氧化和降低血压等作用。
而随着番茄红素抗氧化性的报道，番茄红素的保健品备受青睐，具有抗氧化活性的天然化合物的研究成为热潮。抗氧化性的评价有化学方法和生物学方法。化学方法可通过自由基的清除来表示，简单便捷，准确率高。
自由基是生物体氧化过程中产生的中间代谢产物，当其过多时，会作用于生物膜磷脂不饱和脂肪酸、膜蛋白、代谢酶，影响细胞代谢的有序性和自调节能力，甚至使 DNA 分子变得不稳定，造成 DNA 损伤从而引起基因突变等。尽管活的有机体一定程度上具有清除自由基的能力，但是适当补充外源性抗氧化剂仍然是有必要的。事实上，超氧阴离子自由基(O－2 ·)、二苯代苦味酰基自由基(DP-PH·)和羟自由基(OH·)等与衰老、癌症、心脑血管疾病和炎症的发生与发展密切相关。某些人工合成的抗氧化剂如BHT、BHA 及 PG 等有一定的毒性，会对人体呼吸酶的活性造成不利的影响，甚至还有不同程度的致畸、致癌效应，这也引起了人们对人工化学合成抗氧化剂的担忧。
鉴于此，天然抗氧化剂的开发和使用，正成为现代食品工业发展所关注的焦点之一，具有广阔的应用前景。本试验对枳椇多糖的抗氧化活性进行测定，以期为枳椇的深入开发利用提供参考。
2.项目的目的、意义
本项目拟以拐枣为对象，先利用分光光度法测定加拐枣提取液后的吸光度，从而判断其对自由基的消除能力；接着利用吸光度值进行还原力测定；最后继续
进行多酚含量的测定。最终从这三个测定结果中得到不同拐枣提取物均能表现出不同程度的抗氧化能力。
本项目的研究意义是深入对它们进行分离和活性测定，有可能发现更为有效的天然活性天然抗氧化物质，有利于拐枣的研究开发和应用。
二、项目立项的必要性及市场需求分析
1、项目立项的必要性
长期以来拐枣产品结构单一，产品绝大多数是拐枣酒、拐枣醋等产品，因此采用拐枣生物活性物质的功能技，开发高附加值的产品，培育拐枣生产新的产品，更好为市场提供需要。
而且，随着经济发展，饮酒是更是随之可见，由于各种原因夜晚失眠的情况也多了起来，更甚者，越来越多的人们身体也开始出现免疫力下降导致的疾病。而拐枣具有许多医用价值，所以对它的产品的研究与开发对人类是十分有益的。
2、项目的市场需求分析
随着番茄红素抗氧化性的报道，番茄红素的保健品备受青睐，具有抗氧化活性的天然化合物的研究成为热潮。
在现有技术中，关于利用拐枣制作饮料的研究较为广泛，如利用枳椇子作为原料或者辅料制作保健解酒饮料的方法，李维新等介绍了拐枣果汁加工技术，但是国内外对于拐枣抗氧化活性这一特性的应用却寥寥无几。本工作对拐枣不同溶剂提取物的抗氧化活性进行了研究，从而开拓新的市场。
三、相关领域国内外技术现状、发展趋势及现有工作基础
1、国内外技术现状、专利等知识产权情况分析
该植物始载于《唐本草》果部;李时珍称它为金果树,并在《本草纲目》第31卷中有记载。此外《雷公炮炙论》《救荒本草》等多部医药著作中均有收载。该物属养阴、生津、润燥、止渴、凉血类药物,中医认为其有清热利尿,解酒毒之功效,主治酒毒、烦热、口渴、呕吐、二便不利等症[1]。近年来,国内外学者对枳子的研究有新的进展。
而在1979年，Hiroshi Saito在生药学杂志就发表了枳椇皂苷的药理性质。
2、国内外技术发展趋势
国内对拐枣清除DPPH自由基、还原力测定、多酚含量的测定均采用分光光度计测量吸光值的方法进行测定，其优势在于以下几点：1.最大优势是对于复杂基质样品可以在线分离并准确定性定量；2.可同时测定多组分；3.样品前处理简单；4.检测结果直观显示。
而国外是应用RT-PCR生物测定法筛选天然生物活性物质。
3、现有的工作基础
本研究在安康学院现代农学与生物科技学院陕西省农林与生物科学实验室教学示范中心进行。实验中心下设基础生物、生物技术、农学、园林、食品、蚕学6个专业实验室（内设20个实验分室），1个生物标本室，实验室建筑面积371
5㎡，共有大型精密仪器200多台套，仪器设备总价值810多万元，其中遗传实验室、数码显微实验室、分子生物学实验室以及植物组织培养实验室的相关仪器设备能够保证本研究项目的顺利实施。同时学校还出台的相应的管理措施，可保证项目按要求完成。
项目指导老师是食品科学硕士学位的朱新鹏老师，他研究拐枣多年，具有相当丰富的经验和方法技术，可以帮助我们一起研究。
四、项目计划目标及主要研究内容
1、主要目标
本项目针对拐枣生物活性因子的抗氧化和稳定性的研究，以拐枣为对象，利用吸光值进行生物活性因子的能力测定，获得其抗氧化功效的能力，为拐枣寻找更大的发展空间。
2、研究与开发能力
（1）将新鲜的拐枣捣碎，用85%乙醇提纯。乙醇提取物用水混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇等体积萃取，分别回收溶剂得石油醚提取物，乙酸乙酯提取物，正丁醇提取物和水提取物，将这些提取物配成样品溶液。
（2）对样品溶液采用分光光度计的方法进行抗氧化活性测定，并得到最终拐枣的抗氧化能力，探讨其在此方面的开发价值。
3、项目的技术关键，包括技术难点、创新点
（1）技术难点：在本实验中，研究时间至少三个月，其中，容易产生拐枣的霉变。而且在放置过程中，拐枣的“寿命”也在降低，即生物活性物质可能出现损失甚至丧失，会影响最后的研究结果。
（2）创新点：目前为止，国内外对于许多物质进行了抗氧化分析，但是拐枣饮料的抗氧化活性研究尚未见报道，所以这就是一个创新点。
五、技术、经济效益、市场风险分析
1、技术经济效益分析（含经济效益、社会效益）
（1）经济效益
多酚作为生物活性成分的组成部分，是近年活性成分的一部分研究领域。本项目突破现有材料，另辟蹊径，以拐枣为对象，既拓宽了功能性成分提取的材料来源，又实现了拐枣的深度开发。（2）社会效益
本项目的实施将开发新的产品，本项目的实施将开发高附加值的产品，培育拐枣生产新的经济增长点，对于提高拐枣的整体效益，提高拐枣抗御市场风险的能力，促进拐枣持续健康发展。
2、前景分析（含产业化可行性）
项目实施后将开拓拐枣在功能食品领域的新应用，显著提升拐枣的整体效益，具有非常显著的经济效益。开发的拐枣产品能够改善我国居民醉酒、失眠、免疫力差的情况，目前活性物质的研究，还没有进行规模化生产，随着居民收入增加，居民保健意识的增强和老龄化社会中老年人群保健需求的增加，本项目具有很大的场应用前景。
3、项目实施的风险分析
由于拐枣的抗氧化功效已被证实，所以这个项目没有风险项。项目目的明确，设计合理，方法切实可行。项目指导老师长期从事研究各种物质，并对拐枣有许多研究，所以在我们的研究中，没有什么大的风险。项目实施单位拥
有省级重点实验室平台，完全具有实施该项目的能力，项目完全能够按计划进行并达到预期目标，没有风险。
六、必要的支撑条件、组织措施及实施步骤
1、必要支撑条件
朱老师专门研究拐枣的化学成分，具有相当多的知识及实验经验。而参加这个项目的学生经过一年的实验学习已经具有部分实验操作能力，也通过互联网的学习，了解了拐枣的抗氧化和稳定性功效。
本研究在安康学院现代农学与生物科技学院陕西省农林与生物科学实验室教学示范中心进行。实验中心下设基础生物、生物技术、农学、园林、食品、蚕学6个专业实验室（内设20个实验分室），1个生物标本室，实验室建筑面积3715㎡，共有大型精密仪器200多台套，仪器设备总价值810多万元，其中遗传实验室、数码显微实验室、分子生物学实验室以及植物组织培养实验室的相关仪器设备能够保证本研究项目的顺利实施。同时学校还出台的相应的管理措施，可保证项目按要求完成。
2、组织管理的措施
老师分配任务，组员相互合作，各司其职，尽心尽力完成实验内容及项目。
3、组织实施的步骤
第一步，购买材料。第二步，做实验。
第三步，得出结论，结题。
七、计划实施进展，经费预算及来源渠道
1、年度计划
2016.4—2015.5 提交项目申报书
2015.10—2017.3 做实验，得出结论。2017.4—2017.5 写论文结题。
2、经费预算
能原材料费（拐枣的购买）2000元 研究试验费（拐枣生物活性因子的测定和相关成分的分离提取、鉴定费等）7000元
资料印刷费（相关材料的打印等）1000元
合计10000元。
3、经费来源
国家拨款或者学校拨款。
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